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La chromatographie, une analyse par techniques séparatives avancée, détache les composants d'un mélange complexe selon leurs interactions avec 2 phases non miscibles, stationnaire fixée dans une colonne et mobile.
Les chromatographies sont disponibles en 2 modÚles : la chromatographie en phase gazeuse ou CG pour les composés volatils, et la chromatographie liquide ou CL pour les substances chargées.
Devis pour une chromatographie Ă gaz
La phase mobile utilisée
En chromatographie liquide, la phase mobile est un solvant liquide. La sélection de ce dernier dépend de la polarité et de la solubilité des composés de l'échantillon. La complexité chimique des substances influe également son choix afin de garantir une séparation optimale.
En chromatographie à gaz, la phase mobile est un gaz inerte ou non réactif. Il transporte l'échantillon à travers la colonne de séparation. Il existe 2 types de gaz, l'hélium ou l'azote, à choisir en fonction de la méthode de détection utilisée en fin de processus.
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Les techniques de séparation choisies
Pour la chromatographie en phase liquide ou CL, la dissociation des molécules repose sur leur interaction avec la phase mobile et la phase stationnaire.
Les molĂ©cules polaires sont attirĂ©es par la phase mobile pour quâelles se dĂ©placent rapidement dans la colonne. Celles moins polaires interagissent davantage avec la phase stationnaire pour ralentir leur progression.
Concernant la chromatographie en phase gazeuse ou CG, la dispersion se réalise selon leur volatilité. Cette fois, pour les applications sur des substances moins volatiles, la progression est lente en raison de leurs fortes interactions avec la phase stationnaire.
Devis pour une chromatographie en phase liquide
Le type de composé à analyser
La chromatographie en phase liquide est adaptĂ©e Ă l'analyse de composants solubles, qu'ils soient volatils ou non. Elle sâutilise pour les acides aminĂ©s, les mĂ©dicaments et les glucides.
Lors de l'analyse d'Ă©chantillons biologiques, tels que le plasma sanguin, la chromatographie Ă liquide sĂ©pare les mĂ©tabolites de l'organisme. De mĂȘme, dans le domaine de l'industrie alimentaire, elle examine la prĂ©sence de sucres ou d'additifs dâun produit.
Les chromatographes à gaz sont sollicités pour la vaporisation à température ambiante sans dégradation. Dans les secteurs industriels, ils diagnostiquent la composition de l'air ambiant afin de repérer les polluants, comme les hydrocarbures.
La CG sâemploie aussi pour la prĂ©paration d'Ă©chantillons d'arĂŽmes dans les parfums ou les produits alimentaires.
La vitesse dâĂ©lution et la tempĂ©rature sĂ©lectionnĂ©es
La chromatographie à gaz se distingue par sa vitesse d'élocution rapide, en grande partie due à la volatilité des échantillons et à la température élevée de la colonne.
Cette température varie entre 150 et 300°C. En fonction du débit du gaz porteur, l'élution se produit en quelques secondes à quelques minutes. La manipulation des équipements en CG réclame ainsi une attention particuliÚre pour éviter toute détérioration du tube.
En comparaison, la chromatographie à liquide s'effectue à température ambiante, autour de 20 à 25°C. Cela rend le processus moins contraignant en termes de manipulation, mais l'élution plus lente.
La rĂ©solution de lâanalyse
La rĂ©solution en chromatographie Ă gaz ou CG se base sur la capacitĂ© du mĂ©lange Ă sâĂ©vaporer.
Si 2 Ă©lĂ©ments chimiques ont des poids molĂ©culaires ou des points d'Ă©bullition similaires, ils ont des temps de rĂ©tention proches sur le chromatogramme. La distinction sera ainsi difficile et la rĂ©solution sera classĂ©e comme âfaibleâ.
Par exemple, avec 2 hydrocarbures, le pentane ou Câ
Hââ a un poids molĂ©culaire de 72,15 g/mol et un point d'Ă©bullition d'environ 36°C. Alors que l'hexane ou CâHââ dispose dâun poids molĂ©culaire de 86,18 g/mol et dâun point d'Ă©bullition de 69°C. Avec un temps de rĂ©tention de 3,2 min et de 3,6 min, la rĂ©solution se rĂ©vĂšle faible. Par consĂ©quent, il sâimplique dâajuster les paramĂštres de la chromatographie.
Avec la chromatographie en phase liquide, la résolution se concentre sur l'affinité des composés avec les phases présentes. Lorsque des éléments chimiques ont des propriétés proches en termes d'affinité électrochimique, ils ont des temps de passage comparables dans la colonne.
Si la glycine a un temps de rĂ©tention d'environ 2,5 min et lâalanine de 3 min, la rĂ©solution de la chromatographie liquide en phase gazeuse lc-gc fid impose une amĂ©lioration.
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